原料乳中三聚氰胺快速檢測(cè)液相色譜法GB/T 22400—2008
用乙腈作為原料乳中的蛋白質(zhì)沉淀劑和三聚氰胺提取劑,強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱分離,液相色譜-紫外檢測(cè)器/二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè),外標(biāo)法定量。
該檢測(cè)方法基本操作步驟如下:
稱(chēng)取混合均勻的15 g原料乳樣品(準(zhǔn)確至0.01 g),置于50 mL具塞刻度試管中,加入30 mL乙腈,劇烈振蕩6 min,加水定容至滿(mǎn)刻度,充分混勻后靜置3 min,用一次性注射器吸取上清液用針式過(guò)濾器過(guò)濾后,作為液相色譜分析用試樣。
分析圖譜如下:
HPLC測(cè)定方法:
色譜柱:強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱,
CNWSIL SCX,250 mm × 4.6 mm(i.d.),5 μm
流動(dòng)相:磷酸鹽緩沖溶液-乙腈(70+30,體積比),混勻。
流速:1.5 mL/min。
柱溫:室溫。
檢測(cè)波長(zhǎng):240 nm。
進(jìn)樣量:20 μL。
乳與乳制品中動(dòng)物水解蛋白檢定-L(-)-羥脯氨酸含量測(cè)定法
本方法適用于乳與乳制品中L(-)-羥脯氨酸含量的測(cè)定,通過(guò)對(duì)L(-)-羥脯氨酸含量的測(cè)定,可判定是否為動(dòng)物水解蛋白。
試樣經(jīng)酸水解,釋放出羥脯氨酸。經(jīng)氯胺T氧化,生成含有吡咯環(huán)的氧化物。用高氯酸破壞過(guò)量的氯胺T。羥脯氨酸氧化物與對(duì)二甲氨基苯甲醛反應(yīng)生成紅色化合物,在波長(zhǎng)558nm 處進(jìn)行比色測(cè)定。
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